Аутотрансплантация гемопоэтических стволовых клеток в хирургической практике

Фаязов Р.Р.,  Тимербулатов Ш.В., Саубанов М.Н. ,  Мухаметзянов Г.С.,  Кулушев А.С.,  Рашитова А.Д.

Кафедра хирургии с курсом эндоскопии ИПО ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, г. Уфа

 

Введение

      Об успешном клиническом опыте трансплантации мобилизованных аутологичных гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) для лечения пациентов с субкомпенсированным алкогольным циррозом печени, ишемией нижних конечностей, сахарным диабетом и болезнью Крона сообщают как  зарубежные, так и отечественные исследователи [1, 2, 5, 6, 7, 8, 9, 10]. Проведенные нами эксперименты [3, 4] на лабораторных животных с моделями острого и хронического повреждения печени, панкреатэктомической и аллоксановой инсулиновой недостаточности, ишемии тканей показали значительное ускорение регенерации печени, коррекции инсулиновой недостаточности и стимуляции процессов неоангиогенеза в ишемизированных тканях при применения клеточных культур из костного мозга и селезенки.         

 

Материал и методы

      Выделение из периферической крови стволовых клеток костного мозга проводилось путем лейкафереза (при помощи аппарата для цитоплазмафереза «Cobe Spectra»), после их предварительной стимуляции с использованием гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ) (препарат «Нейпоген» (Швейцария).

      Мы располагаем  результатами лечения 12 пациентов с циррозом печени, которым производилась аутотрансплантация гемопоэтических стволовых  клеток костного мозга. Степень тяжести заболевания расценивалась как B по шкале Child-Pugh.

      Клеточная терапия аутологичными мононуклеарами костного мозга также проведена 2 больным с сахарным диабетом  1 типа, 4 - с атеросклеротической ишемией нижних конечностей и 2 - с неспецифическим язвенным колитом (НЯК).

      Дизайн исследования в случае цирроза печени предполагал трехкратную с интервалом в 3 дня мобилизацию клеток костного мозга в периферический кровоток с последующим сбором CD34+ фракции и разделение ее на 2 половины (рис. 1). 2/3  части фракции трансплантировалась реинфузией через реканализированную пупочную вену в систему воротной вены (рис. 2.). 1/3 часть CD34+ фракции культивировалась в течение 7 суток и хранилась в криобанке. Эффективность мобилизации ГСК у  пациентов составила в среднем 2,2 млн. CD34+ клеток на кг веса (трехкратная  мобилизация и  лейкаферез). В случае ишемии нижних конечностей CD34+ фракция вводилась по 1 мл во внутримышечное пространство объемом до 100 мл. У больных с сахарным диабетом CD34+ фракция вводилась пункционно в круглую связку печени, а у больных с НЯК – внутривенно, капельно.

 

Рис. 1. Мобилизованные и выделенные гемопоэтические стволовые клетки костного мозга (фракция CD34+), подготовлены к аутотранстпантации (150 млн. клеток).

Рис. 2. Трансплантация  аутологичных гемопоэтических клеток  (фракция   СD34+)  в реканализированную пупочную вену.

 

Результаты

      Результатом исследования у группы больных с циррозом печени явилось значительное улучшение клинических, лабораторных и инструментальных показателей, оцениваемых по шкалам Child-Pugh. Все пациенты наблюдаются более 12 месяцев с момента первичной трансплантации клеток. Через 6 месяцев после первичной трансплантации больным проведилась повторная аутотрансплантация  культивированной и криозамороженной CD34+ фракции.

      У больных с ишемией нижних конечностей исследование показателей микроциркуляторного кровотока показало наличие положительной динамики, что в клинических примерах отразилось в улучшении качества жизни, и отодвинуло сроки реконструктивных операций.

      В группе больных с сахарным диабетом ожидаемого эффекта не получено, хотя в течение первых 2-х месяцев больные отмечали улучшение общего состояния, наблюдалось  незначительное снижение показателей сахара крови, увеличение в крови С-пептида.

      У больных с НЯК после клеточной терапии также отмечалось улучшение общего состояния, резко снизилось количество стула, на некоторое время отпала необходимость применения гормонотерапии.

 

Выводы

1. Клинический опыт показывает выполнимость и безопасность процедуры мобилизации, лейкафереза и реинфузии гемопоэтических стволовых клеток костного мозга с использованием Г-КСФ у пациентов с тяжелыми стадиями цирроза печени, сахарного диабета, ишемии конечностей и НЯК.

2. Результаты исследования показывают наличие клинической эффективности данного перспективного высокотехнологичного направления.        

3. В условиях отсутствия эффективных методов лечения и дефицита донорского материала аутологичная клеточная терапия пациентов с декомпенсированными формами заболеваний печени может стать реальной альтернативой традиционным методам и служить «мостом» при «ожидании» трансплантации органа.

 

Литература

1. Берсенев А.В. Клеточная трансплантология – история, современное состояние и перспективы //  Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. – 2005. - № 1. – С. 49-56.

2. Строжаков Г.И., Эттингер О.А. Перспективы использования стволовых клеток в гепатологии // Медицинская кафедра. – 2006. - № 3-4. - С. 4-8; 97-103.

3. Тимербулатов В.М., Фаязов Р.Р., Хасанов А.Г., Тимербулатов М.В., Уразбахтин И.М. Хирургия абдоминальных повреждений / М.: МЕДпресс-информ, 2005. - 255 с.

4. Тимербулатов Ш.В. Трансплантация селезеночной ткани в профилактике и лечении инсулиновой недостаточности (клинико-экспериментальное исследование). Дисс. … канд. мед. наук. – Уфа, 2007. - 23 с.

5. Фаязов Р.Р., Хасанов А.Г., Тимербулатов Ш.В., Сибиряк С.В., Саубанов М.Н., Рабинович В.И., Ярмухаметов И.М. Клеточные технологии в хирургии: мировой опыт и перспективы развития в Республике Башкортостан //  Медицинский Вестник Башкортостана. Спец. выпуск. - 2007. - № 2. – С. 135-143.

6. Шевченко Ю.Л. Медико-биологические и физиологические основы клеточных технологий в сердечно-сосудистой хирургии / СПб.: «Наука», 2006. – 287 с.

7. Yang C. et al. Transplantation of cord blood endothelial progenitor cells ameliorates limb ischemia // Zhonghua Yi Xue Za Zhi 2003; 83; 16: 1437-1441;

8. Al-Khaldi A. et al. Therapeutic angiogenesis using autologous bone marrow stromal cells: improved blood flow in a chronic limb ischemia model // Ann. Thorac. Surg. 2003; 75;1: 204-209;

9. Murohara T. et al. Transplanted cord blood–derived endothelial precursor cells augment postnatal neovascularization // J. Clin. Invest. 2000; 105: 1527–1536;

10. Hirata K. et al. Autologous bone marrow cell implantation as therapeutic angiogenesis for ischemic hindlimb in diabetic rat model // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2003; 284; 1: H66-70;

 

 

©, Коллектив авторов, 2011. e-mail: timersh@yandex.ru.

 

Метки и направления этого материала:

Свойства публикации:

  • Дата поступления: 2011-10-20 22:25:00
  • Дата публикации: 2011-10-27 22:25:00
  • 2011. Том 1 (№ 1).