Клеточные технологии в хирургии: мировой опыт и перспективы развития в Республике Башкортостан

Фаязов Р.Р., Тимербулатов Ш.В., Рахматуллин С.И., Саубанов М.Н., Саяпов М.М. 

Проблемная научно-исследовательская лаборатория трансплантологии «Башкирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, г. Уфа

 

Введение

      Существование стволовых клеток в некоторых тканях сначала было предсказано теоретически. Е. В. Wilson (1896) еще в первом издании своей книги «Клетка в развитии и наследственности» предположил существование стволовых клеток, обеспечивающих поддержание сперматогенеза. Российский гистолог А.А. Максимов в 1908 г. постулировал существование стволовой кроветворной клетки. Первые в мировой науке работы по стволовым клеткам еще в 1960–1970-е гг. выполнили советские ученые И.Л. Чертков и А.Я. Фриденштейн, но мировая шумиха началась только в конце 90-х, когда стволовые клетки заново «открыли» американцы [3, 15, 25, 39].

      Изучение кинетики клеточных популяций в быстро обновляющихся тканях, таких как кровь, эпителий кишечника, эпидермис, показало, что в них происходит очень быстрая смена дифференцированных клеток. Так, в процессе гемопоэза у человека ежечасно продуцируется, и, следовательно, разрушается 1 миллиард эритроцитов и 100 миллионов лейкоцитов. Такое количество специализированных клеток, естественно, может быть обеспечено только за счет пролиферации некоторого числа самоподдерживающихся клеток, которые стали рассматривать как стволовые [6, 8, 9, 22, 36].

      Основные элементы концепции стволовых клеток были разработаны при изучении системы гемопоэза и в дальнейшем распространены на другие быстро обновляющиеся ткани, в частности эпидермис. В последнее время появились сообщения о том, что стволовые клетки присутствуют и в таких органах как центральная нервная система, где ранее их существование не предполагали. Сотни миллионов долларов, которые в США инвестировали в исследование гематопоэтических стволовых клеток за последние 40 лет вылились в успешные методы лечения стволовыми клетками при лейкемии и других нарушениях крови [3, 8, 25].

      При осознании данного, родилась идея сбора и использования стволовой клетки для регенерации даже в структурах и точках, которым не характерно самообновление. Такие клетки разработаны для «создания» в утробе и затем поддержания данной системы организма в течение жизни называемыми «соматическими стволовыми клетками»; сейчас же установлено, что они находятся во многих органах. Именно потому, что эти клетки «научились» понимать, что их «место нахождения» данная система организма, они достаточно хороши в регенерации широкого, но, тем не менее, специфического круга клеток определенных органов [3, 15, 16, 30].

      Гематопоэтические стволовые клетки (получение из пуповинной крови и плаценты) создают широкий ряд клеток крови, но не могут создавать нервных клеток. Для одной группы органов эти ограничения достаточно полезны, особенно, если соматические стволовые клетки могут быть готовы к выделению и выращиванию в больших количествах. Для другой же, особенно для органов, в которых эти соматические стволовые клетки сложно определить и вырастить, такие ограничения достаточно проблематичны [1, 4, 8, 9, 18, 19, 26]. Фетальные стволовые клетки, получаемые из органов плодов, также являются полиопотентными и слабодифференцированными [3, 8, 9, 16, 22, 33]. «Эмбриональные стволовые клетки» появляются на раннем этапе развитии, когда эмбрион невелик как маленькая спичечная головка (7 дней стадия «бластоциста»). Эмбриональные стволовые клетки пока еще не «обучены» собственному «месту» в организме, они могут дать рост клеткам многих органов. В зависимости от сигналов, которые они получают, клетки могут производить нервные клетки или клетки крови, клетки других типов. Важным является то, что они не имеют "возраста" и становятся необычными в культуре. Можно затем попытаться «инструктировать» эти клетки как нужно созревать в какой-то отдельный тип при подаче сигналов, которые они могли бы получить и в природных условиях [3, 8, 20, 21, 23, 24, 33, 34, 36].

      Поведение и характерные черты стволовых клеток во многом зависят от физиологических особенностей тех тканей, в которых они находятся. Самое существенное свойство стволовых клеток заключается в том, что они могут самоподдерживаться в течение длительного времени и при этом производить дифференцированные клетки, которые выполняют в организме специфические функции [8, 9, 13, 14, 15, 20, 21, 24, 27, 37, 38].

      Пролиферативный потенциал стволовых клеток в обновляющихся тканях очень велик и продолжительность жизни популяции стволовых клеток может значительно превосходить продолжительность жизни организма, что было показано путем последовательного пассирования гемопоэтических стволовых клеток мышам, получившим летальную дозу облучения. Имеются данные, согласно которым с возрастом число стволовых клеток у людей уменьшается, но все еще остается на достаточно высоком уровне. В то же время продолжительность жизни отдельных стволовых клеток может быть ограниченной. Некоторые стволовые клетки функционируют только в определенном временном интервале. К их числу можно отнести эмбриональные и фетальные стволовые гемопоэтические клетки. Поведение стволовых клеток во многом определяется свойствами тех тканей, в которых они находятся и которые они поддерживают [3, 8, 9, 14, 35, 38].

      Стволовые клетки не существуют в организме сами по себе, они находятся в определенном микроокружении, которое обычно обозначают термином ниша. В настоящее время этот термин используется для обозначения совокупности факторов, обеспечивающих жизнеспособность и самовоспроизведение стволовых клеток и дифференциацию дочерних транзиторных клеток. Среди этих факторов следует упомянуть наличие базальной мембраны, молекул внеклеточного матрикса и присутствие соседних клеток, продуцирующих факторы роста и другие регуляторные молекулы. Ниша активно участвует в регуляции пролиферации и дифференциации стволовых клеток, она обеспечивает самоподдержание стволовых клеток и длительное их пребывание в состоянии покоя. Стволовые клетки прочно закреплены в нише молекулами адгезии, в частности интегринами. В то же время свободные стволовые клетки могут находить путь в соответствующую нишу благодаря хемотаксису. Ниши являются частью структурно-функциональных единиц, из которых состоят ткани [3, 8, 9, 14, 15, 17, 35, 38].

      Многие типы стволовых клеток способны длительное время находиться в состоянии покоя, в результате чего они редко делятся и имеют поэтому большую продолжительность клеточного цикла. Это относится, например, к стволовым клеткам кожи и крови. Моррис и Поттен установили, что в дорсальном эпидермисе и волосяных фолликулах взрослых мышей стволовые клетки могут находиться в покое в течение 8-10 недель [3, 8, 9, 15, 22, 25, 35, 38].

      Одна из важных характеристик стволовых клеток заключается в том, что они продуцируют дифференцированные клетки и в то же время самоподдерживаются. Теоретически возможны два способа реализации такого поведения стволовых клеток. Во-первых, стволовая клетка может вступить в "асимметричный митоз", в результате которого возникнут две дочерние клетки с разными свойствами: одна из них останется стволовой, а другая - приступит к дифференциации. Во-вторых, стволовая клетка может делиться симметрично, но в дальнейшем, попадая в разное микроокружение, дочерние клетки могут пойти по разным путям развития. Таким образом, в зависимости от ситуации стволовые клетки могут выбирать между симметричным и асимметричным делением [3, 8, 9, 15, 25].

      Часто возникает вопрос о степени дифференцированности стволовых клеток. Стволовые клетки взрослого организма менее дифференцированы, чем специализированные клетки, которым они дают начало, но более дифференцированы, чем их предшественники из эмбриональных тканей [3, 8, 9, 15, 16, 33, 39].

      Стволовые клетки способны продуцировать дочерние клетки, которые в дальнейшем дают начало различным линиям дифференцированных клеток, что обозначается термином "мультипотентность". Например, гемато-поэтические стволовые клетки дают начало всем линиям клеток крови. Но могут быть стволовые клетки, которые дифференцируются только в одном направлении (монопотентность). В отличие от "взрослых" (постнатальных) стволовых клеток, эмбриональные стволовые клетки обладают тотипотентностью, то есть могут дифференцироваться и давать начало линиям клеток, относящимся к трем зародышевым листкам и характеризующимся нейральными, гематопоэтическими и другими маркерами. Было установлено, что стволовые клетки костного мозга способны не только восстанавливать кроветворение, но также находить новые ниши и дифференцироваться в клетки других органов: печени, мозга, скелетных мышц и сердца. Стволовые мезенхимальные клетки, выделенные из костного мозга, могут дифференцироваться практически во все типы соматических клеток. В связи с этим было предположено, что стволовые клетки представляют собой не столько конкретные клетки, сколько биологическую функцию. Однако есть авторы, считающие, что такое расширенное толкование феномена стволовых клеток пока еще преждевременно. По-видимому, статус стволовых клеток должен постоянно поддерживаться за счет поступающих в клетки сигналов и синтеза определенных белков. Микроокружение производит сигналы, определяющие поведение стволовых клеток [3, 6, 8, 9, 15, 16, 19, 35, 38, 39].

      За последнее время увеличилось число сообщений, согласно которым стволовые (или подобные им) клетки могут быть выделены из разнообразных тканей взрослого организма. Причем эти клетки способны мигрировать в поврежденные участки тканей и стимулировать репарацию дефекта либо путем дифференциации в клетки этих тканей, либо путем создания микроокружения, усиливающего репарацию эндогенных стволовых клеток.

      Какие приблизительные цели терапии стволовыми клетками? Существует несколько типов заболеваний – или аспектов заболеваний, которые могут быть применимы в ближайшем будущем:

  1. Заболевания, когда расположение трансплантированных клеток не является ключевым – сахарный диабет 1 типа. В этом случае основной вызов заключается в том, чтобы разработать клеточный тип клеток, которые могут безопасно, эффективно и перманентно функционировать как островковые клетки [7, 10, 12, 14, 17, 27, 28, 29, 32, 37].
  2. Существуют заболевания, при которых спасают или обеспечивают защитой умирающие клетки, или притупляется воспаление или рубцевание, снижают симптомы или замедляется прогрессию процесса. Принимая во внимание сложности развития некоторых органов – печени и головного мозга, например – сохранение, предварительно существующих клеточных типов и их связей важнее – и возможно безопаснее – чем попытаться реконструировать должным образом новые органы. По некоторым аспектам цирроз печени, инсульт, повреждение спинного мозга, травма головы, Паркинсонизм, рассеянный склероз и заболевание Альцгеймера таковы, что при них возможно опосредованное лечение. При этом лечение будет эффективным перед наступлением этапа существенной деградации организма [1, 3, 5, 6, 8, 9, 10, 11, 13, 16, 18, 19, 22, 25, 35, 38, 39].
  3. Для клеточных технологий, которые можно использовать в клинической практике, в первую очередь представляют интерес "взрослые" (постнатальные) стволовые клетки. Существенным моментом является то, что стволовые клетки, например эпидермиса человека, можно длительное время культивировать вне организма и таким образом наращивать большое количество клеток. При этом стволовые клетки сохраняют свой пролиферативный потенциал и могут быть трансплантированы реципиенту [1, 3, 4, 6, 10, 15, 39].
  4. Многие исследователи связывают большие перспективы для клинической практики с использованием эмбриональных стволовых клеток. Эмбриональные стволовые клетки можно стимулировать к дифференциации в разные типы клеток. Однако в настоящее время еще существуют сомнения в полной безопасности использования эмбриональных стволовых клеток для тканевой инженерии. Существуют серьезные проблемы в этическом плане, также большие сложности выделения бластоцисты [3, 8, 20, 21, 23, 36, 39].

      В соответствии с приказом МЗ РФ №325 на базе Башкирского Государственного Медицинского Университета в 2000 году организована Проблемная научно-исследовательская лаборатория трансплантологии, основными задачами которой являются научная и методическая проработка вопросов связанных с клеточными технологиями в медицине, а также организация забора, анализа и хранения стволовых клеток. Выделено и отремонтировано специальное помещение, соответствующее международным требованиям чистоты GMP,  получено оборудование для выделения и долговременного хранения стволовых клеток. Подготовлена программа научных исследований и совместной практической работы с клиническими больницами г.Уфы. Получены 3 патента РФ по клеточным технологиям. Подготовились к лицензированию.

      При разработке способов и методов выделения стволовых клеток используются только разрешенные методики, обеспечивающие использование наиболее доступного материала для выделения клеток  (собственная кровь пациента, пуповинная кровь и плацентарный материал).

      При работе клеточными культурами придерживаемся следующих нормативных документов, разработанных Минздравом РФ:

  1. Закон РФ «О трансплантации органов и (или) тканей человека» (1992);
  2. Закон РФ «О временном запрете на клонирование человека» (19 апреля 2002 года);
  3. Кодекс врачебной этики (1997);
  4. Этический кодекс Российского врача (1994);
  5. Приказ МЗ РФ № 301 от 28 декабря 1993 г. разрешающий практику искусственной фертилизации;
  6. Государственный реестр новых медицинских технологий;
  7. Приказ МЗ РФ от 29.08.2001 № 345 «О создании Экспертного Совета по рассмотрению научных исследований в области развития клеточных технологий и внедрению их в практическое здравоохранение»;
  8. Указание МЗ РФ О признании утратившими силу документов о клеточных препаратах (06.03.2002);
  9. Проект «Временной инструкции о порядке использования клеточных технологий в учереждениях здравоохранения РФ»;
  10. Временная инструкция о порядке исследований в области клеточных технологий и их использования в учреждениях здравоохранения (18.04.2002);
  11. Программа «Новые клеточные технологии — медицине»;
  12. Приказ от 25 июля 2003 г. N 325 «О развитии клеточных технологий в Российской Федерации».

      За период работы лаборатории выполнены экспериментально-клинические исследования по следующим разделам:

1. Изучение возможности коррекции инсулиновой недостаточности клеточными культурами селезеночной ткани в различных вариантах (фетальные, соматические);

      Учитывая данные некоторых трансплантологов и свои клинические наблюдения [12, 14, 17, 26, 27, 28, 29, 32, 37], где указывается, что в некоторых случаях, клетки полностью повторяют глюкозо-чувствительные инсулин-вырабатывающие островковые бета клетки поджелудочной железы, что может стать терапевтическим методом при лечении диабета даже, если клетки не трансплантируют в поджелудочную железу, мы изучили в эксперименте возможности дифференцировки клеточных культур различных тканей в инсулинопродуцирующие клетки. Более перспективным в этом направлении являются родоначальные клетки костного мозга, которые при определенных условиях (микроокружение, наличие факторов роста) могут компенсировать недостаточную функцию островковых клеток. Но нас, как хирургов больше интересовала проблема постпанкреатэктомической инсулиновой недостаточности. Занимаясь проблемой профилактики и коррекции постспленэктомического синдрома в хирургической практике мы акцентировали внимание на том, что аутотрасплантация селезеночной ткани может явиться одним из вариантов клеточной терапии, следовательно, селезенка – источником стромальных и гемопоэтических стволовых клеток [1, 5, 11, 12, 13, 14, 28, 29].

Выполненное экспериментальное исследование на белых крысах дали следующие результаты:

А. Фенотипическая характеристика спленоцитов в культурах показали, что у взрослых крыс доля стволовых гемопоэтических клеток составило 11%, в культуре эмбриональных клеток 31%;

Б. Результаты цитофлюрометрии на проточном цитометре клеточной структуры, извлеченной из брюшной полости фрагментов селезенки через 7 суток после аутотрансплантации характеризовались наличием стволовых гемопоэтических и стромальных стволовых клеток;

В. Аллогенная, аутогенная трансплантация культивированной селезеночной ткани и трансплантация культивированной эмбриональной селезеночной ткани приводило к коррекции экспериментального постпанкреатэктомического и аллоксанового сахарного диабета, что в данной ситуации можно увязать возможностью восстановления синтеза инсулина стволовыми клетками;

2. Возможность клеточной терапии хронических гепатитов и циррозов печени в эксперименте было показано экспериментальным исследованием (к.м.н. С.И. Рахматуллин, 2001 г.); Клиническое применение фетальных гепатоцитов носило ограниченный характер, только по решению Этического комитета Ученого Совета БГМУ и по настоятельному желанию больных. Показаниями явились хронические гепатиты и циррозы печени в стадии компенсации и субкомпенсации. Метод трансплантации за период с 2002 по 2006 гг. применен у 32 пациентов. Имплантация культивированных фетальных гепатоцитов проводилась в систему воротной вены лапароскопическим и миниларатомным способами. Объем вводимых клеток дотигал от 10 до 20 млн. клеток. Послеоперационных осложнений не наблюдали.

      Эффективность метода подтверждалось стойкой ремиссией патологического процесса, которая выражалось в улучшении общего состояния, биохимических показателей, снижения асцита, снижения частоты кровотечений из варикозно-расширенных вен пищевода. Достоверное сокращение размеров селезенки и печени, а также диаметров их сосудов мы наблюдали в 5 случаях. Необходимо отметить, что улучшение  состояния носило временный характер, и ее продолжительность составляло до 1 года. Поэтому пациентам потребовалось повторное введение клеточной культуры, что позволяло достичь более длительной ремиссии (до 1,5 лет).

      Более перспективным направлением представляется использование аутологичных клеточных культур, т.н. стромальных стволовых клеток. В этом году, впервые в хирургической практике республики, больному с циррозом печени в стадии субкомпенсации выполнена  аутотрансплантация рекрутированных и культивированных родоначальных клеток костного мозга в систему воротной вены. Суть метода заключалась в стимулировании и рекрутировании родоначальных клеток крови в периферическую систему, после чего путем использования элементов гравитационной хирургии родоначальные клетки сортировались и культивировались в лаборатории в течение 7 суток, после чего была выполнена аутотрансплантация этих клеток в систему воротной вены с использованием минилапаротомного доступа. Ранний послеоперационный период протекал без особенностей. Улучшение общего состояния и биохимических показателей крови, отсутствие прогрессирования заболевания по данным инструментальных методов исследования в отдаленном периоде (3 месяца) позволяет надеяться, что метод получит широкое применение и может стать альтернативой существующим способам стимулирования гепатоцитов.

      Выполненное клинико-экспериментальное исследование позволило заключить, что клеточная терапия является одним из альтернативных методов лечения больных с диффузными заболеваниями печени; применение фетальных клеток гепатоцитов позволяет существенно улучшить качество жизни больных; более эффективное применение клеточной терапии подразумевает необходимость внедрения в практику повторного курсового введения фетальных гепатоцитов;

3. Изучение возможности использования фибробластов в лечении ожогов мягких тканей и трофических нарушений

      В лечении ожоговых поверхностей при обширных поражениях кожи (более 30%) у 3 детей и 4 взрослых нами использовались культивированные фибробласты. Сразу хочется отметить, что данная методика позволило во всех случаях избежать летального исхода, и сократить сроки заживления ожоговых поверхностей. Мы также располагаем единичными наблюдениями эффективности клеточной терапии при болезни Паркинсона, при лечении последствии травм и инсультов головного мозга, трофических язв.

      Широкому внедрению разработанных методов лечения с одной стороны припятствуют отсутствие регулирующей законодательной базы, с другой стороны – отсутствие финансирования. Выход из создавшийся ситуации видится в  принятии Программы развития клеточных технологии в Республике Башкортостан и создании лицензированной структуры, отвечающий за внедрение перспективного метода лечения в медицинскую практику. Статью хотелось бы завершить тезисом из статьи 12 универсальной декларация ЮНЕСКО «О Геноме и правах человека» (1999):

«Свобода научных исследований, необходимая для прогресса знаний, есть часть свободы мысли. Практическое приложение знаний генома человека должно быть направлено на улучшение здоровья человека, как индивидов, так и всего человечества».

 

Литература

  1. Апарцин К.А. Хирургическая профилактика и способы коррекции послеоперационного гипоспленизма. / Дисс. … док-ра мед. наук.- Иркутск, 2001. - 293 с.
  2. Баранов В.Г., Соколоверова И.М., Гаспарян Э.Г. и др. Экспериментальный сахарный диабет. Роль в клинической диабетологии. – Л.: Наука. – 1983. – 240 с.
  3. Берсенев А.В. Клеточная трансплантология – история, современное состояние и перспективы. //  Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2005. - № 1. - С. 49-56.
  4. Лосева Е.В. // Успехи Физиол. наук.- 2001. Т. 12, № 1. С. 19-37.
  5. Онищенко Н.А., Базиева Ф.Х., Мамхегова Т.Р., Первакова Э.И.    // К механизму восстановления функций пораженной печени с помощью устройств биоискусственной поддержки печени. //Трансплантология и искусственные органы. - 1997. - № 4. - С.  86-91.
  6. Оганесян Т. Клетки свободной специализации // Эксперт – наука и технология. 2002. - № 26.
  7. Поташов Л.В., Галибин О.В., Черникова М.В., Гринев К.М. Проблемы эндокринологии. – 1987. - № 4. - С. 43-44.
  8. Репин В.С., Ржанинова А.А., Шаменков Д.А. Эмбриональные стволовые клетки: фундаментальная биология и медицина. – М.: «Реметэкс», 2002.- 175 с.
  9. Сергеев В.С. Иммунологические свойства мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток. //  Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. - 2005. - № 2. - С. 39-42.
  10. Скалецкий Н.Н., Кирсанова Л.А., Блюмкин В.Н., В кн.: «Проблемы трансплантологии и искусственных органов», М. - 1994. - С. 73-80.
  11. Тимербулатов М. В., Хасанов А.Г., Фаязов Р.Р., Каюмов Ф.А. Органосохраняющая и миниинвазивная хирургия селезенки. - Москва.: «МЕДпресс-информ», 2004. - 218 с.
  12. Тимербулатов В.М., Фаязов Р.Р., Тимербулатов Ш.В., Саяпов М.М., Саубанов М.Н. Перспективы использования трансплантации селезеночной ткани при экспериментальной инсулиновой недостаточности / Вестник Уральской медицинской академической науки. - Екатеринбург -  2006.- № 1. - С. 113-116. 
  13. Тимербулатов В.М., Фаязов Р.Р., Хасанов А.Г., Тимербулатов М.В., Уразбахтин И.М. Хирургия абдоминальных повреждений. - М.: МЕДпресс-информ, 2005. - 255 с.
  14. Тимербулатов В.М., Фаязов Р.Р., Хасанов А.Г., Рахматуллин С.И., Тимербулатов Ш.В., Саяпов М.М.  Возможна ли коррекция инсулиновой недостаточности путем аутотрансплантации селезеночной ткани? / Хирургия. - 2006. - №3. - С. 22-28.
  15. Фриденштейн А.Я., Лурия Е.А. Клеточные основы кроветворного микроокружения. М.: Медицина, 1980. - 216 с.
  16. Шевченко Ю.Л. Медико-биологические и физиологические основы клеточных технологий в сердечно-сосудистой хирургии. – СПб.: «Наука», 2006. – 287 с.
  17. Шумаков В.И., Скалецкий Н.Н.  Трансплантация островковых и других эндокринных клеток. // В кн.: «Трансплантология - руководство».  Тула: «Репроникс Лтд.», 1995. - С. 317-331.
  18. Bieback K., Susanne Kern S., Klüter H. et al. Critical Parameters for the Isolation of Mesenchymal Stem Cells from Umbilical Cord Blood // Stem Cells. - 2004. - Vol. 22. - P. 625-634.
  19. Bianco P., Robey P. Mesenchymal Stem Cell: clinical applications // J. Clin. Invest. - 2000. - Vol. 105. - P. 1663-1668.
  20. Boeuf H., Hauss C., De Graeve F. et al. LIF factor dependent transcriptional activaton of embryonic stem cells // J. Cell Biol. - 1997. - Vol. - 138. - P. 1207-1217.
  21. Bristle O., Jones K., Leraish R. et al. Embryonic stem cell-derived glial precursors: a source of myelinating transplants // Science. - 1999. - Vol. 285. - P. 754-756.
  22. Deans R.J., Moseley A.B. Mesenchymal stem cells: biology and potential clinical uses // Exp. Hematol. - 2000. - Vol. 28. - P. 875-884.
  23. Deutschman T.C., Eistetter H., Katz M. et al. The in vitro development of blastocyst-derived embryonic stem cell lines // Embryol. Exptl. Morphol. - 1985/ - Vol. 87. - P. 27-45.
  24. Evans M.J., Kaufman M.H. Establishment in culture of pluripotent cells from mouse embryos // Nature (Lond.). - 1981. - Vol. 292. - P. 154-156.
  25. Friedenstein A.J., Petrakova K.V., Kurolesova A.I., Frolova G.P. Heterotopic of bone marrow. Analysis of precursor cells for octeogenic and hematopoeietic tissue // Transplantation. - 1968. - Vol. 6. - P. 230-247.
  26. Hauss R., Lange C., Weissinger E.M., Kolb H.J., et al. Evidence of peripheral blood-derived, plastic-adherent CD34(-/low) hematopoietic stem cell clones with mesenchymal stem cell characteristics // Stem Cells. - 2000. - Vol 18. - P. 252-260.
  27. Hofstetter C., Schwarz E., Hess D. et al. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. - 2002. - Vol. 99, № 4. - P. 2199-2204.
  28. Kodama S., Faustman D.L. Routes to regenerating islet cells: stem cells and other biological therapies for type 1 diabetes // Pediatr. Diabetes. - 2004. - Vol. 5 (Suppl 2). - P. 38-44.
  29. Kodama S., Davis M., Faustman D.L. Diabetes and Stem Cell Researchers Turn to the Lowly Spleen // Sci. Aging Knowl. Environ. - 2005. - Issue 3, pe 2, 19 January 2005.
  30. Leiden J.M. Beating the odds: a cardiomyocyte cell line at last // J. Clin. Investig. - 1999. - Vol. 103. - P. 591-592; P. 697-705.
  31. Lewis R. A stem cell legacy: Leroy Stevens; The Scientists, A Stem Cell Legacy: The Scientist. - 2000. - Vol. 14. - P. 19-24.
  32. Musaro A. et al. Stem cell-mediated muscle regeneration is enhanced by local isoform of insulin-like growth factor 1 // PNAS. - 2004. - Vol. 101, № 5. - P. 1206-1210.
  33. Pittenger M.F., Mackay A.M., Beck S.C. et al. Multilineage potential of Adult Mesenchymal stem cells // Science. - 1999. - Vol. 284. - P. 143-147.
  34. Robertson E. Pluripotential stem cell lines as a route into the mouse germ line // Trends Genet. - 1986. - Vol. 2. - P. 9-13.
  35. Robey P.G. Stem cells near the century mark // J. Clin. Invest. - 2000. - Vol. 105. - P. 1489-1491.
  36. Saburi S., Azuma S., Sato E. et al. Developmental fate of single embryonic stem cells microinjected into 8-cell-stage mouse embryos // Differentiation. - 1997. - Vol. 62. - P. 1-11.
  37. Ryan E.A., Lakey J., Paty B.W. et al. // Diabetes. - 2002. - Vol. 51. - P. 2148-2157.
  38. Torella et al. Cardiac stem cell and myocyte aging, heart failure, and insulin-like growth factor-1 overexpression // Circ. Res. - 2004. - Vol. 94. - P. 514-524.
  39. Thomson J. et al. Embryonic stem cell lines derived from human blastocyst // Science. - 1998. - Vol. 282. - P. 1145-1147.

©, Коллектив авторов, 2012. e-mail: timersh@yandex.ru.

Метки и направления этого материала:

Свойства публикации:

  • Дата поступления: 2012-01-24 22:13:00
  • Дата публикации: 2012-02-05 22:13:00
  • 2012. Том 4 (№ 2).